Серологические методы диагностики

Сыворотка и серологические реакции

Кровь – это уникальная жидкая ткань, которая, кроме важнейшей функции – переноса кислорода к тканям и отведения от них углекислого газа – выполняет еще много полезной работы. Она транспортирует различные соединения, в нее секретируются гормоны, посланные к органам-мишеням от эндокринных желез с «особыми поручениями».

Кровь выполняет защитную функцию, за счет находящихся в ней антител, которые представлены белками класса иммуноглобулинов. Защищают нас от внедрения гнойной инфекции и хищные лейкоциты – нейтрофилы, которые постоянно ищут и уничтожают микробов. В норме кровь по большей части стерильна (см. статью Анализ на стерильность крови). Как же все эти, и многие другие процессы могут протекать в одно и то же время?

Очень просто. Кровь неоднородна по составу. Если цельную кровь поместить в пробирку, и добавить туда немного цитрата натрия или гепарина, чтобы она не свернулась, а потом отцентрифугировать, то содержимое пробирки разделится на два слоя. В первом будут находиться клетки, а выше – часть жидкой основы, которая не содержит клеток. Это плазма, или иначе – сыворотка.

Сыворотка содержит простые вещества: ионы хлора, натрия, калия, магния. Она имеет рН 7,36 – слабощелочную реакцию. В ней находятся белки, жиры, углеводы, билирубин, мочевина, креатинин, ферменты, антитела. Именно сыворотка является субстратом для проведения многих биохимических, иммунологических и серологических анализов.

Всем известна «биохимия» крови. Но нельзя говорить о биохимическом исследовании в единственном числе, обязательно нужно уточнение. Врач сообщает пациенту о том, что ему назначен биохимический анализ крови, чтобы посмотреть общий белок, белковые фракции, билирубин, сахар, и так далее. Всего методом биохимического анализа можно обнаружить около сотни метаболитов и соединений, но такой подробный и дорогой анализ вряд ли нужен.

Серологическое исследование – это тоже целая группа сходных реакций, которые протекают в сыворотке при введении в нее определенных реагентов. Они фиксируются в количественном (выделено столько-то) или качественном (выделено или не выделено) виде. Но, увы, это слишком общая формулировка. В плазме слишком много всего находится.

Чем же занимается серология с точки зрения лабораторной диагностики, и чем она может быть полезна пациенту?

Какой материал исследуется

— сыворотки крови;

— слюны;

— фекальных масс.

Материал в кратчайшие сроки должен оказаться в лаборатории. В противном случае его можно сохранить в холодильнике при температуре 4 или добавив консервант.

Материалом при
иммунологических исследованиях может быть биологический материал от
людей (сыворотка крови, слюна, фекалии), а также материал из
объектов окружающей среды (почва, вода и др.).Для выявления антител к
антигенам гельминтов и простейших у людей иммунологическими
методами в настоящее время используется сыворотка крови
обследуемого человека.

3.1. Забор крови на
исследование проводится по общепринятым гематологическим методикам
(забор венозной крови проводят в процедурных кабинетах
лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), капиллярной крови — в
диагностических лабораториях ЛПУ и других аккредитованных
лабораториях).

3.2. Подготовка сыворотки
проводится в лабораториях.

3.2.1. Кровь в пробирке
отстаивают в течение 1-2 ч при комнатной температуре или 0,5-1 ч
при 37 °С в термостате, предварительно отслоив стерильной
пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой сгусток от краев
пробирки. Для лучшей ретракции сгустка пробирку помещают в
холодильник при 4 °С на 1-2 ч или центрифугируют 10 мин при 3000
об.

/мин или 20 мин при 1500 об./мин. Сыворотку отсасывают
стерильной пипеткой в стерильные стеклянные пробирки (ампулы,
флаконы) или полистироловые микропробирки типа «Эппендорф» с
крышками.При массовых
обследованиях населения ампулы с сывороткой перед
транспортированием и хранением запаивают, избегая нагревания
сыворотки, флаконы закрывают стерильными резиновыми пробками,
микропробирки закрывают крышками.

3.3. Хранение,
транспортирование крови и сыворотки.Кровь доставляется в
лабораторию в день взятия. В этот же день из нее должна быть
подготовлена сыворотка, которая может храниться до исследования в
холодильнике при 2-4 °С не более 4-6 дней. При длительном хранении
(более 2-х недель) сыворотку необходимо хранить в замороженном виде
при температуре — 20-25 °С, допускается глубокое замораживание до —
70 °С.

Не допускается замораживание и размораживание сыворотки
более 1 раза.Длительное хранение
сывороток приводит к частичной потере активности антител, особенно
иммуноглобулинов класса М (IgM).При массовом заборе крови
от населения, при длительном хранении сывороток до исследования (в
течение года) и с целью предупреждения потери активности антител,
необходимо хранить сыворотки в глубоком холоде, при температуре не
выше — 20-40 °С.

Серологические методы диагностики

До замораживания
сыворотку от одного обследуемого можно разлить в несколько
полистироловых микропробирок с крышками типа «Эппендорф», что
позволяет размораживать не всю сыворотку, а ее отдельную часть.Транспортирование
замороженных сывороток должно быть при тех же температурных
условиях, не допускающих размораживания (в сумках-холодильниках или
термосах со льдом, можно использовать сухой лед).Сыворотку перед
исследованием необходимо разморозить полностью и тщательно
перемешать во избежание потери концентрации антител.

Особенности исследований

При исследовании на бруцеллез проводится контроль сыворотки крови на самозадержку без антигена. Это позволяет повысить достоверность теста. Результат анализа на бруцеллез может быть положительным, отрицательным или невыраженным, то есть вызывающим сомнения. При получении сомнительных результатов, рекомендуется повторный забор крови. Также бруцеллез диагностируется по результатам посева крови, исследования костного мозга и спинно-мозговой жидкости.

Диагностика с применением серологических методов широко используется в современной медицине. Особенно актуален этот тест при выявлении вирусных и инфекционных заболеваний. Этот же тип анализов используется при географических скринингах и медицинских обследованиях для предотвращения эпидемиологических вспышек.

Серологические анализы имеют ряд преимуществ.

  • Серологический тест любого типа имеет высокую достоверность.
  • Анализы на серологию проводятся достаточно быстро. Результат РСК известен уже через сутки, а получить его можно посредством интернета, не выходя из дома. В особых случаях при стационарном лечении тест проводится в течение нескольких часов.
  • РСК позволяет контролировать развитие болезни, и отслеживать эффективность проводимого лечения.
  • Серологические методы исследования отличаются невысокой стоимостью и доступны пациентам.

Серологические анализы имеют и некоторые недостатки. Для того, чтобы обследование дало максимально достоверную информацию анализ крови следует проводить с учетом времени инкубационного периода болезни.

Простой герпес 1 и 2 типа можно определить только спустя 2 недели после заражения, а исследование на вирус иммунодефицита проводится спустя 1, 3 и 6 месяцев после контакта с больным.

На достоверность исследования может повлиять человеческий фактор. Если пациент пренебрегает правилами подготовки к исследованию или лаборант допустил ошибку в обработке образца крови, возможно получение ложного или сомнительного результата. Такая ситуация возникает приблизительно в 5% случаев. Как правило, лечащий врач на основании клинических показаний легко вычисляет ошибку РСК.

Серологическое исследование крови современный и надежный способ выявления таких опасных заболеваний как ВИЧ, гепатит, бруцеллез, ЗППП и пр. Этот раздел медицины направлен на изучение плазмы крови человека и ее иммунологических свойств. Серологический метод широко распространен, а стоимость исследований в частных лабораториях сравнительно невысока. Для проведения анализа используется современное оборудование, которое сводит к минимуму влияние человеческого фактора на результаты исследований.

Что может повлиять на результат анализа

Иммунофлюоресцентный
метод (непрямой вариант) представлен двухэтапной реакцией, при
которой обнаружение искомого антитела в комплексе антиген-антитело
(АГ-AT) (1 этап) происходит с помощью конъюгата — антиглобулина,
гомологичного по отношению к белкам иммунной сыворотки, меченного
флюоресцеин-изотиоцианатом.

Серологические методы диагностики

Добавление конъюгата не обязательно для
выявления комплекса АГ-AT при наблюдении в люминесцентном
микроскопе. В диагностический набор для РИФ входит: антигенный
препарат (специально размеченные предметные стекла с
зафиксированной на их поверхности взвеси корпускулярного антигена),
контрольные положительная и отрицательная сыворотки,
люминесцирующая антивидовая сыворотка и реагенты.

Принцип проведения реакции иммунофлюоресценции(непрямой вариант)


Подготовка растворов.-
Титрование испытуемых сывороток и их контрольных образцов.-
Нанесение подготовленных разведении испытуемых и контрольных
образцов сывороток на специально размеченные предметные стекла с
антигеном.-
Инкубация препаратов с образцами во влажной камере (время и
температура согласно инструкции).


Отмывание препаратов в трех сменах фосфатно-солевого буфера (ФСБ)
от непрореагировавших компонентов сыворотки.-
Высушивание препаратов на воздухе.-
Нанесение люминесцирующей антисыворотки (конъюгата) в рабочем
разведении на стекла с антигеном.-
Инкубация препаратов во влажной камере при комнатной
температуре.


Отмывание препаратов в трех сменах ФСБ от непрореагировавших
компонентов флюоресцирующей антисыворотки.-
Высушивание на воздухе.-
Нанесение препаратов на предметное стекло в забуференный глицерин
под покровные стекла.-
Микроскопирование препаратов в люминесцентном микроскопе.Результаты реакции
оценивают по наличию и интенсивности поверхностного
зеленовато-желтого свечения клеток антигена по 4-балльной
системе:

Серологические методы диагностики


3-4 креста — яркая флюоресценция зеленого цвета по периферии клетки
токсоплазм, четко контрастирующая с телом клетки;-
2 креста — слабое, но явно зеленое свечение периферии клетки;-
1 крест — очень слабое свечение периферии клетки, не
контрастирующее с телом клетки.Отсутствие свечения
клеток и их границ «ободка» в отрицательном контроле при ярком
флюоресцировании «ободка» клеток, обработанных положительной
контрольной сывороткой, подтверждает надежность проводимого
исследования.

Реакция непрямой
гемагглютинации основана на способности эритроцитов адсорбировать
на своей поверхности антиген и при контакте со специфическими
антителами склеиваться и образовывать осадок, видимый невооруженным
глазом.Она рекомендуется для
диагностики описторхоза в острой фазе, трихинеллеза и эхинококкоза
в острой и хронической фазах заболевания рекомендуется РНГА.

Метод
обладает высокой чувствительностью (до 90-98%) в острой фазе
описторхоза, трихинеллеза и хронической — трихинеллеза и
эхинококкоза. В хронической фазе описторхоза чувствительность РНГА
не превышает 45%.Реакцию непрямой
гемагглютинации можно использовать в качестве теста, дополняющего
результаты иммуноферментного анализа, для повышения достоверности
серологической диагностики гельминтозов.

Диагностический набор
содержит: формалинизированные эритроциты барана,
сенсибилизированные специфическим антигеном (Д ), эритроциты барана
без антигена (Д-), сыворотка диагностическая агглютинирующая,
положительный контрольный тест (К ), сыворотка нормальная человека
— отрицательный контрольный тест (К-), эритроциты барана сухие (Э),
реагент для приготовления раствора для разведения сывороток.

5.2.1. Принцип постановки РНГА

1) подготовка растворов,
необходимых для проведения анализа;

2) подготовка испытуемых
сывороток и контрольных сывороточных образцов;

3) нанесение на планшет
испытуемых и контрольных образцов;

4) внесение диагностикума
(Д ) и эритроцитов без антигена (Д-);

5) инкубация;

6) учет результатов.Результаты анализа
учитываются в титрах и по интенсивности реакции, выраженной в
крестах. При оценке результата реакции по 4-крестной системе
учитывается характер осадка эритроцитов на дне лунок:-
резко интенсивная реакция ( ) — все эритроциты агглютинированы и
покрывают дно лунок, образуя «зонтик»;


интенсивная реакция ( ) — агглютинированы почти все эритроциты,
образуя зонтик, в центре которого имеется заметное кольцо из
осевших неагглютинированных эритроцитов;-
реакция средней интенсивности ( ) — на дне лунки различается
осадок из неагглютинированных эритроцитов в виде плотного широкого
кольца;


реакция слабой интенсивности ( ) — мелкие агглютинаты на дне лунки,
большинство эритроцитов не агглютинировало и осело в центре лунки в
виде маленького кольца;-
реакция отрицательная (-) — эритроциты осели на дне лунки, образуя
«пуговку» или маленькое колечко с ровными краями.Учет проводится при
соответствующих показателях контролей:

Серологические методы диагностики

Д — не образует
спонтанной агглютинации в отсутствии сывороток, с К- — не
агглютинируют в разведении выше диагностического титра, с К —
агглютинируют (см. инструкцию по применению).Д- — не образуют
спонтанной агглютинации в отсутствии сыворотки, а также с К и
испытуемыми сыворотками.Титром сыворотки считают
последнее разведение, при котором наблюдается четкая агглютинация
не менее чем на 3 креста ( ). Диагностические титры реакции с
эритроцитарными диагностикумами указаны в инструкции по
применению.

Реакция иммуноферментного
анализа (ИФА) основана на специфическом взаимодействии антигена и
антитела с предварительной иммобилизацией (фиксацией) одного из
компонентов реакции (антигена или антител) на твердофазном носителе
(в лунках полистироловых планшетов, стрипов и др.) и выявления
образовавшегося комплекса АГ-AT посредством ферментной метки
(конъюгат).


высокой специфичности и чувствительности;-
возможности использования универсальных реагентов и
отконтролированных диагностических тест-систем; высокая
стабильность реагентов (не менее 6 месяцев);-
возможность стандартизации проведения анализа и учета его
результатов за счет автоматизации процесса.

ортофенилендиамина (ОФД), 5-аминосалицидовой
кислоты (5-АС) или тетраметилбензидин (ТМБ).Учет результатов при
использовании 5-АС и ОФД проводят по оптической плотности при длине
волны 492 нм, а при использовании ТМБ — при 450 нм на сканирующем
спектрофотометре типа Мультискан, Униплан, Биоскрин, Стат-Факс и
т.п.

При отсутствии прибора автоматического измерения оптической
плотности возможен визуальный учет результатов анализа по
интенсивности цветовой окраски раствора в тех случаях, когда это
предусмотрено инструкцией по применению.Диагностический набор
(тест-система) включает:-
твердофазный носитель с адсорбированным на нем специфическим
антигеном паразита;

5.3.1. Подготовка к работе

Режим работы лаборатории,
выполняющей серологические исследования на паразитарные
заболевания, должен соответствовать СП 1.2.731-99 «Безопасность работы с
микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами».Все исследуемые образцы
сывороток крови следует считать потенциально инфицированными,
независимо от результатов тестов, которые провел производитель
тест-системы.

серологические исследования

5.3.2. Подготовка проб исследуемых сывороток

Подготовку сыворотки
крови проводить в соответствии с п.3 (п.п.3.2). Сыворотку во
избежание гемолиза крови следует отбирать не позже чем через 2 ч
после взятия крови. Тест-системы отечественного производства и
некоторые импортные наборы чувствительны к наличию гемолиза в пробе
и вследствие этого могут давать ложноположительные результаты. При
приготовлении сывороток должны быть приняты все меры, позволяющие
исключить их контаминацию.

5.3.3. Принцип постановки ИФА

1. Подготовка
растворов, необходимых для проведения анализа

Серологический анализ крови позволяет выявить у пациента наличие заболевания, вызванного проникновением в организм инфекции. После его проведения врачами-лаборантами производится расшифровка полученных данных, которые позволяют клиницистам более полно судить о патологическом процессе. Опуская всю профессиональную терминологию, можно сказать, что отсутствие в крови проверяемого антител является положительным результатом и отрицает наличие у него инфекционного заболевания.

В этом случае процедура повторяется дважды. Сначала диагностируют наличие возбудителя заболевания, а потом по росту антител определяют степень прогрессивности процесса. Наличие возрастания образования комплексов «антиген-антитело» характеризует скорость заражения человека.

Специфика исследований

Серологические анализы имеют широкую распространенность практически во всех странах планеты. Обширное применение происходит из-за информативности исследования. Отличный метод для выявления каких-либо заболеваний, который используется как окончательный этап диагностики. Особо хорошо себя проявил при выявлении различных заболеваний вирусного или инфекционного происхождения. Применение серологического метода широко используется для предупреждения различных эпидемий и пандемий.

серологические исследования крови

Вероятность человеческой ошибки

Очень большое влияние на это анализ имеет человек. Если человек халатно относится к элементарным правилам тщательной подготовки к серологическому методу, то можно исказить результаты. Также ошибку может допустить сотрудник лаборатории, который неправильно подсчитал составляющие биологического материала. Доля вышеперечисленных изъянов составляет около 3-5%. Опытный доктор может заметить данную ошибку и направить больного на повторную сдачу анализов.

Данное направление в сфере медицины дает возможность изучать плазму крови и все свойства. Что касается стоимости проведения анализа, то он весьма невысок. Поэтому можно без особых проблем произвести это исследование. Качество серологического исследования гарантируется за счет новейших аппаратов, которые практически не допускают ошибок.

Серологическое исследование крови

— определения количества антител против вирусов и микробов, находящихся в организме. Для этого в сыворотку крови добавляется антиген возбудителя заболевания, после чего оценивается происходящая химическая реакция;

— определения антигена путем введения в кровь антител;

— определения группы крови.

Серологические исследования крови всегда назначаются два раза — для определения динамики развития заболевания. Однократное определение взаимодействия антигенов и антител свидетельствует лишь о факте заражения. Для отражения полной картины, где можно наблюдать увеличение количества связей между иммуноглобулинами и антигенами, необходимо повторное исследование.

Области применения серологических исследований

Область применения серологических реакций весьма широка:

  • Определение групп крови
  • При переливании крови (для установления специфичности белков)
  • Выявление эффективности вакцинации
  • Установление источника инфекции и путей ее распространения, иммунитета
  • Установление причины атипичных пневмоний, болезни легионеров, кишечных инфекций, миокардитов, вирусных гепатитов
  • Установление точного диагноза при аутоиммунных заболеваниях, когда некоторые ткани в организме человека настолько изменяют свои свойства, что организм пытается от них «защититься» при помощи образования антител

1.1. Настоящие
методические указания устанавливают основные методы серологической
диагностики паразитарных заболеваний, проводимые аккредитованными,
лицензированными лабораториями лечебно-профилактических учреждений,
органов и учреждений государственной санитарно-эпидемиологической
службы, ведомственных учреждений, научно-исследовательских
учреждений и других диагностических (испытательных) лабораторий вне
зависимости от ведомственной принадлежности и форм
собственности.

1.2. Методические
указания предназначены для специалистов лабораторий, выполняющих
серологические исследования на паразитарные заболевания и
использующих медицинские иммунобиологические препараты (МИБП)
отечественного и зарубежного производства, зарегистрированные на
территории Российской Федерации и разрешенные к применению
Министерством здравоохранения Российской Федерации.

Кому назначают серологические исследования

Исследования рекомендуют пациентам для установления диагноза при широком спектре инфекционных болезней. Проводят серологические исследования при определении группы крови, а также для выяснения эффективности лечения.

Зачем его делать

Метод ценится специалистами как способ сделать качественную диагностику заболевания.

  • Если больной находится в стадии заболевания, то повторные исследования рекомендуется проводить с интервалом примерно – неделя, чтобы наблюдать за эффективностью применяемого лечения.
  • Часто серологические исследования используют, чтобы определить, какой возбудитель вызвал болезнь уже после того, как пациент ее перенес.

Виды процедуры

Методы серологических исследований используют в своей основе различные реакции:

  • Реакция нейтрализации полагается на свойстве антител иммунной сыворотки действовать как нейтрализующее средство на токсины или сами микроорганизмы, предупреждая их повреждающее действие.
  • Реакция агглютинации, которая, в свою очередь, подразделяется на такие подвиды:
    • прямые реакции – их применяют при исследовании сыворотки крови на присутствие антител. В изучаемый состав вбрасывают убитые микробы и, если выпадает осадок в виде хлопьев, то значит, что на этот вид микробов реакция положительная;
    • реакция непрямой гемагглютинации производится введением в сыворотку крови эритроцитов, на которых адсорбированы антигены; эти агенты входят во взаимодействие с такого же рода антигенами, присутствующими в сыворотке крови, в результате этого выпадает фестончатый осадок.
  • Реакция с участием комплемента применяют для выявления инфекционных болезней. Метод реализуется через активацию комплемента и наблюдением за происходящими реакциями в исследуемой среде.
  • Реакция преципитации осуществляется наслоением раствора антигена на жидкую среду – иммунную сыворотку. Антиген для этого метода применяют растворимый. Реакция заключается в том, что комплекс антиген-антитело претерпевает осаждение; полученный осадок называют преципитатом.
  • Реакция с использованием меченых антигенов и антител основана на том, что микробы или антигены тканей, обработанные определенным образом, получают способность под действием ультрафиолетовых лучей излучать свет. Метод используют не только при диагностировании антигенов, но и для определения лекарственных веществ, ферментов, гормонов.

В связи с тем, что метод заключается в изучении биологического материала пациента, он не может воздействовать негативно на человека. Поэтому противопоказаний к применению не имеется.

Как проводится серологическое исследование, расскажем ниже.

серологические методы исследования

Метод применяют для определения возбудителя инфекции, в том числе при таких заболеваниях:

  • цитомегаловирусная инфекция,
  • ВИЧ-инфекция,
  • герпес,
  • токсоплазмоз,
  • воспаленные околоушные лимфоузлы,
  • лабиринтопатия,
  • инфекционные болезни, полученные половым путем;
  • дифтерия,
  • вирус Эпштейна-Барра,
  • опоясывающий лишай,
  • сывороточная болезнь,
  • наличие золотистого стафилококка в ушах;
  • бруцеллез,
  • инфекционный дерматит,
  • буллезный отит,
  • бластомикоз,
  • стафилококковые инфекции,
  • гепатит.

Также метод используют для выявления таких заболеваний:

  • описторхоз,
  • амебиаз,
  • цистицеркоз,
  • лямблиоз,
  • пневмония.

Особых приготовлений к процедуре не требуется. Следует соблюдать одно условие: забор крови делается натощак.

Алгоритм забора (взятия) крови (материала) на серологическое исследование описан ниже.

Проведение анализа

Забор крови делают из локтевой вены. Для того чтобы исследование получилось, кровь набирают не шприцом, а самотеком. В вену вводят иглу без шприца и собирают в пробирку до 5 мл крови.

Во время процедуры пациент испытывает небольшой дискомфорт во время введения иглы в вену. Последующие действия совсем не вызывают беспокойства.

Расшифровка результатов серологического исследования крови описана ниже.

Полученные результаты следует рассматривать совместно с клинической картиной болезни, проверкой предполагаемого диагноза с использованием нескольких тестов. Это связано с тем, что исследования имеют специфичный характер и иногда не обладают абсолютной чувствительностью к инфекционным заболеваниям.

Цена на комплексное серологическое исследование крови описана ниже.

Какая цена процедуры будет зависеть от вида исследования. Она состоит из стоимости произведения анализа и стоимости антител к определенному возбудителю болезни. Средняя стоимость процедуры в пределах 700 руб.

Сравнительная характеристика и использование методов серологических исследований в медицинской практике

Методы С. и. непрерывно совершенствуются в направлении повышения чувствительности и универсальности использования. Изначально серол. диагностика основывалась на выявлении антител. С появлением в середине 20 в. реакций иммунофлюоресценции и пассивной гемагглютинации, обладающих большей чувствительностью, появилась возможность обнаруживать не только антитела, но и антиген непосредственно в материале от больных.

Энзим-иммунологический и радиоиммунологический методы, по чувствительности на 2—3 порядка превышающие иммунофлюоресценцию и пассивную гемагглютинацию, приближаются к методам биол. обнаружения бактерий и вирусов. Область их применения для обнаружения как антигенов, так и антител теоретически не ограничена.

Серодиагностика инф. болезней базируется на появлении антител к выделенному или предполагаемому возбудителю независимо от того, был ли обнаружен возбудитель в острой стадии болезни. Исследуют пары сывороток крови, взятых в начале болезни и 2—3 нед. спустя. Прирост антител во второй сыворотке крови не менее чем в 4 раза по сравнению с первой является диагностически значимым.

Имеет также значение, каким классом иммуноглобулинов представлены антитела. IgM-антитела обнаруживают в конце острого периода болезни и в ранней стадии реконвалесценции. IgG-антитела появляются в более поздние сроки реконвалесценции и циркулируют долго. Если у женщины в первом триместре беременности обнаруживают IgM-антитела к вирусу краснухи, то это служит основанием для прерывания беременности, т. к.

С. и. широко применяют в эпидемиологии. Систематический сбор и исследование образцов крови различных групп населения позволяют уяснить контакты населения с источником возбудителей инф. болезней. Изучение уровня коллективного иммунитета позволяет выявлять группы повышенного риска и планировать прививочные мероприятия, изучать географическое распространение инфекций. С. и.

С. и. имеют большое значение в изучении наследственных болезней (см.) и аутоиммунных болезней, сопровождающихся появлением ткане- и органоспецифических антител, разрушающих соответствующие клетки-мишени, а также в онкологии для обнаружения опухолевых антигенов. Так, иммунодиагностика рака печени основана на определении в сыворотке крови больных альфа-фетопротеина и других эмбриональных антигенов методом иммунодиффузии и радиоиммунологическим методом.

Значительный прогресс науки в изучении тонкой антигенной структуры клеточных антигенов, антигенов бактерий и вирусов достигается благодаря применению в серол. реакциях моноклональных антител, к-рые можно получать к отдельным детерминантам антигена.

См. также иммунодиагностика.

Библиография: Методы исследований в иммунологии, под ред. И. Лефковитса и Б. Перниса, пер. с англ., М., 1981; Руководство по иммунологии, под ред. О. Е. Вязова и Ш. X. Ходжаева, М., 1973; Руководство по клинической лабораторной диагностике, под ред. В. В. Меньшикова, М., 1982; Immunology, ed. by J.-F. Bach, N. Y., 1978.

1. Реакцией флюоресценции, которая проводится в два этапа. Сначала выявляются антитела в циркулирующем комплексе антиген. Затем на контрольный образец наносится антисыворотка, с последующим инкубированием препаратов. РИФ применяется для быстрого обнаружения возбудителя заболевания в исследуемом материале. Результаты реакций оцениваются с помощью люминесцентного микроскопа. Оценивается характер свечения, форма, размер объектов.

— прямые реакции, использующиеся для обнаружения антител в сыворотке крови больного. Определенное количество убитых микробов добавляется к сыворотке и вызывает образование осадка в виде хлопьев. Серологические исследования на брюшной тиф подразумевают проведение именно прямой реакции агглютинации;

— реакции пассивной гемагглютонации, основанные на возможности эритроцитов адсорбировать антиген на своей поверхности и вызывать склеивание при его контакте с антителом, и выпадение видимого осадка. Применяется в процессе диагностики инфекционных заболеваний для выявления повышенной чувствительности к определенным препаратам.

— очень чувствителен;

— используемые реагенты — универсальны, и они стабильны на протяжении полугода;

— процесс учета результатов анализа автоматизирован.

Выше перечисленные серологические методы исследования имеют некоторые преимущества перед бактериологическим методом. Эти методы позволяют определить антигены возбудителей за несколько минут или часов. Более того, эти исследования могут выявлять антигены возбудителя даже после проведения лечения и гибели бактерий, вызывающих его.

В
клинической практике серологические методы исследования являются
дополняющими к комплексу клинико-инструментальных (эхинококкозы,
цистицеркоз, токсокароз) и паразитологических (описторхоз,
трихинеллез) показателей для целей дифференциальной диагностики
паразитарного заболевания от заболевания со сходной клинической
картиной.

Трихинеллез.
Возбудитель нематода Trichinella spiralis и ее вариитеты. Острое
заболевание, сопровождающееся лихорадкой, развитием отеков,
миалгией и эозинофилией крови. При тяжелом течении возможно
поражение миокарда, центральной нервной системы. Серологическая
диагностика трихинеллеза осуществляется с учетом штаммовых
особенностей возбудителя заболевания, а также состояния иммунной
системы инвазированного.

серологические исследования крови расшифровка

Выработка специфических антител происходит
в период миграции личинок трихинелл и концентрации их в мышцах. Их
выявление в серологических реакциях у лиц, заразившихся при
употреблении в пищу мяса домашних животных (свиньи) с высокой или
средней интенсивностью инвазии трихинеллами (200-500 личинок на 1 г
мяса) происходит на 15-20 сутки после заражения.

При меньшей
интенсивности инвазии сроки выявления антител удлиняются. При
заражении людей от диких животных (медведь, кабан, барсук, нутрия)
антитела выявляются спустя 4-6 недель. В течение 2-4 месяцев
показатели серологических реакций могут нарастать. Через 4-5
месяцев после заражения эти показатели снижаются, однако остаются
на диагностическом уровне не менее 1,5 лет, а при интенсивном
заражении до 2-2,5 и более лет.

Для ранней серологической
диагностики трихинеллеза желательна одновременная постановка двух
серологических реакций, например, одновременно реакции непрямой
гемагглютинации (РНГА) и иммунноферментного анализа (ИФА).
Совпадение их результатов свидетельствует о правильности
диагноза.Чувствительность ИФА и
РНГА достигает 90-100%, а специфичность — 70-80%.

Результаты двух
реакций совпадают в 80-90% случаев. Ложноположительные результаты
анализа чаще наблюдаются при острой фазе ряда гельминтозов
(описторхоз, клонорхоз и др.), в связи с чем для дифференциального
диагноза требуется тщательное изучение клинико-эпидемилогического
анамнеза. Серологический диагноз трихинеллеза ставится на основании
4-кратного прироста титра антител.

При невозможности исследования
сыворотки в начале заболевания, исследуется сыворотка крови,
полученная в период реконвалесценции. У больных с подозрением на
трихинеллез, при первичном получении отрицательного или
сомнительного результата реакции, исследование крови необходимо
повторить через 10-14 дней, нарастание титров подтверждает инвазию
трихинеллами.

Специфическая терапия
трихинеллоцидными препаратами вызывает подъем титров антител,
которые сохраняются в диагностических значениях на протяжении 6-12
месяцев, а затем снижаются. У лиц с подозрением на трихинеллез и
получавших превентивное лечение серологическое обследование
проводят через 2-3 недели после лечения.

У переболевших
трихинеллезом антитела сохраняются в течение длительного времени —
от 2-х и более лет.При массовых
обследованиях населения на трихинеллез сыворотки крови исследуют в
одном диагностическом разведении методом скрининга, как указывается
в инструкциях к тест-системе ИФА и диагностическому набору РНГА.

В
случае положительного результата анализа у обследованных и при
наличии у них клинической картины трихинеллеза, сыворотку титруют в
последовательных двукратных разведениях, начиная от
диагностического.Показания к
серологическому обследованию:-
наличие клинических симптомов (лихорадка неясного генеза, отек
лица, миалгия, эозинофилия и др.);

при наличии в эпиданамнезе указаний на
употребление в пищу мяса и мясопродуктов из свинины, медвежатины и
других животных — потенциальных хозяев трихинелл).Описторхоз.
Возбудитель трематода Opisthorchis felineus. Tpeматодоз печени,
протекающий на ранней стадии в виде острого аллергоза с высокой
эозинофилией крови, на поздней — с преимущественным поражением
гепатобилиарной системы, с умеренно повышенным или нормальным
уровнем эозинофилов.

Серологическая
диагностика описторхоза на ранней фазе заболевания, до начала
яйцепродукции паразитом, является единственным методом лабораторной
диагностики, при хроническом описторхозе является вспомогательным
методом, при котором требуется подтверждение паразитологическими
методами диагностики.

Чувствительность реакции (ИФА и РНГА) в
острую фазу приближается к 100%, в хронической фазе заболевания —
до 70%, и зависит от интенсивности инвазии. Ложноположительные
результаты анализа возможны при исследовании сыворотки здоровых лиц
в 1,0%, больных непаразитарными заболеваниями (аллергозы, патология
желудочно-кишечного тракта, гепатобиллиарной системы, системные
заболевания) — в 1,5%, токсоплазмозом — в 5,6%, токсокарозом — в
7,3%, эхинококкозом — в 15,4%, трихинеллезом — в 20,0%, фасциолезом
— в 29,4% случаев.

В
очагах описторхоза у коренных жителей наблюдаются низкие показатели
серологических реакций вследствие врожденной толерантности. У
пришлого населения (рабочие-вахтовики, переселенцы и др.)
вследствие отсутствия врожденной невосприимчивости к заражению
описторхисами, как правило, регистрируются высокие показатели
серологических реакций.

При серодиагностике
возможно получение ложноотрицательных результатов на фоне
иммунодефицитных состояний вследствие сопутствующих хронических
заболеваний или индуцированных приемом медикаментов (антибиотиков,
глюкокортикостероидов, химиопрепаратов).Показания к
серологическому обследованию:-
высокая эозинофилия крови или лейкемоидная реакция по
эозинофильному типу у лиц, употреблявших в пищу речную рыбу;

серологические исследования на брюшной тиф


лица, работавшие или проживавшие в эндемичных по описторхозу
районах, а в настоящее время страдающие заболеваниями
желчевыводящих путей.Эхинококкозы.
Возбудитель однокамерного эхинококкоза — личиночная форма цестоды
Echinococcus granulesus, многокамерного эхинококкоза — Echinococcus
multilocularis.

Тяжелые, хронически протекающие гельминтозы с
поражением печени и других органов, приводящие в части случаев к
инвалидизации и летальным исходам.Серологические реакции
при эхинококкозах используют для первичной диагностики, для оценки
результатов оперативного и консервативного лечения и наблюдения за
больными в динамике, для раннего выявления рецидивов заболевания.

Локализация и жизнеспособность ларвоцист эхинококка гидатидозного и
альвеолярного, интенсивность инвазии, а также состояние иммунной
системы хозяина влияют на интенсивность антителообразования и
выявляемость инвазированных с помощью серологических реакций.Наиболее эффективными для
диагностики эхинококкозов являются реакции РНГА и ИФА, с помощью
которых выявляются до 90-98% инвазированных, независимо от видовой
принадлежности паразита.

Совпадение двух реакций наблюдается в 90%
случаев. Максимальная выявляемость эхинококкозов серологическими
методами (до 98%) наблюдается при локализации эхинококковых пузырей
живого паразита в печени, брюшной полости и забрюшинном
пространстве, а также при множественном и сочетанном поражении. При
поражении легких, а также при наличии 1-3 кист небольшого (до 2 см)
размера эффективность серологической диагностики ниже и колеблется
в пределах 70-80%.

Наименее информативны серологические методы
диагностики при эхинококкозе нервной (спинной или головной мозг,
глаз), мышечной или костной ткани, а также при погибшем и
обызвествленном паразите. В этом случае чувствительность
диагностических препаратов не превышает 40%. При серологической
диагностике эхинококкозов возможна регистрация ложноположительных
результатов, возникающих при наличии в крови неспецифических
антител, сходных по структуре с антителами к эхинококку.

Наиболее
часто ложноположительные результаты выявляются при соматических и
инфекционных заболеваниях, сопровождающихся обширными
деструктивными процессами в пораженных органах (цирроз печени,
туберкулез легких и других тканей, онкологические заболевания).
Возникновение ложноположительных реакций возможно при других
гельминтозах (описторхоз, фасциолез и цистицеркоз).

Низкие титры антител
могут быть выявлены в ранний период болезни (кисты диаметром до 2
см), а также при обызвествленных оболочках ларвоцист; резкое
снижение титров может наблюдаться при далеко зашедшем процессе, в
поздней, неоперабельной стадии эхинококкозов. Высокие титры антител
могут быть выявлены у больных с активным процессом, чаще
локализованном в органах брюшной полости;

в случае легочной
локализации кисты эхинококка (даже при наличии кисты больших
размеров) титры антител могут быть низкими.Показания к
серологическому обследованию:-
наличие объемного образования или кист в печени и других
органах;-
эпидзначимые контингента — лица, относящиеся к группам риска
(охотники и члены их семей; зоотехники;

серологические исследования анализы и их расшифровка

чабаны и пастухи; работники
кожевенных предприятий и т.д.), лица, проживающие в очагах
эхинококкозов.Токсокароз —
вызывается мигрирующими личинками аскаридат собак Toxocara canis.
Инвазия с длительным рецидивирующим течением, полиморфными
клиническими проявлениями и высокой эозинофилией периферической
крови.

геофагия) и др.У
пациентов, имеющих симптоматику, характерную для токсокароза, титры
антител (AT) в ИФА 1:800 и выше подтверждает клинический диагноз. У
лиц при отсутствии клинической симптоматики титр AT в ИФА 1:400 и
ниже свидетельствует о контакте человека с возбудителем без
развития патологического процесса.

Ложноположительные результаты
анализа могут наблюдаться у лиц с системными лимфопролиферативными
заболеваниями и нарушениями в системе иммунитета. Это определяет
необходимость проведения анализа клинической картины заболевания.
Ложноотрицательный и сомнительный результат анализа может
наблюдаться у лиц с поражением токсокарами глаз в результате
слабого антигенного воздействия.

Лиц с низким положительным
результатом ИФА (титр 1:200-1:400) ставят на диспансерный учет и
каждые 3 месяца проводят серологическое исследование. При появлении
клинической картины заболевания и повышения титров специфических
AT, врач принимает решение о необходимости проведения лечебных
мероприятий.

Наши последние записи

0 голосов

1161

Особенности сдачи анализа на ТОРЧ-инфекции при беременности

Зачем сдают анализ на ТОРЧ-инфекции при беременности и ее планировании? Что означает этот анализ? Какие опасные последствия могут спровоцировать заболевания, входящие в перечень ТОРЧ. Профилактические меры.

0 голосов

1655

Как сдавать анализ на хеликобактер пилори и как он расшифровывается

Анализ на хеликобактер пилори: как сдавать, и какой метод диагностики лучше выбрать? Подготовка к сдаче материала и расшифровка результатов, наличие антител.

0 голосов

1290

Как сдавать анализ крови на хламидии и как расшифровать результаты

В каких случаях сдают анализ крови на хламидии? Что такое хламидиоз? Порядок проведения анализа на хламидии. Как расшифровываются результаты? Факторы, влияющие на показатели.

Серологические методы диагностики

0 голосов

1380

Особенности анализа на ТОРЧ инфекции

Кому назначается анализ ТОРЧ и что он показывает? Когда и как сдавать анализ? В чем опасность ТОРЧ-инфекций. Расшифровка результатов анализа. Особенности ТОРЧ у новорожденного.

0 голосов

1786

Что показывает анализ крови на ЗППП

Что такое анализ крови на ЗППП? Группы возбудителей половых инфекций. Общие симптомы инфекционных половых заболеваний. Методы современной диагностики болезней, передающихся половым способом.

0 голосов

2417

Как расшифровывается анализ крови на цитомегаловирус

В каких случаях необходимо сдавать анализ крови на цитомегаловирус. Расшифровка результата, признаки и последствия вирусной инфекции.

0 голосов

Как определяется бактериальная инфекция по анализу крови у детей

Серологические методы диагностики

В чем отличие бактериальной инфекции от вирусной? Что делать, при недомогании малыша? Показатели крови при бактериальной и вирусной инфекции. К какому врачу следует обращаться в сложившейся ситуации?

0 голосов

3392

Что значит если anti hcv total положительный и что делать

Anti hcv total положительный — что это значит? Симптомы и пути заражения вирусным гепатитом С, методы диагностики, расшифровка анализов и лечение заболевания.

0 голосов

1847

Серологические методы диагностики

Анализ крови на ВПЧ: подготовка и результаты

Чем опасен вирус папилломы человека? Когда требуется обязательный анализ крови на ВПЧ? Методы выявления вируса. Как подготовиться к анализу крови? Правильная расшифровка результатов.

0 голосов

1604

Hcv анализ крови: что это, и для чего он нужен?

HCV анализ крови — что это? Методы, позволяющие обнаружить вирус. Диагностика серологического характера и его расшифровка. ПЦР-диагностика и расшифровка результатов. Особенности экспресс-диагностики.

Диагностическая ценность исследования

Результаты серологических исследований являются ценным диагностическим методом, но имеют вспомогательную значимость. Базой для диагноза все равно остаются клинические данные. Серологические исследования делаются для подтверждения диагноза, если реакции не противоречат клинической картине. Слабоположительные реакции серологических исследований без подтверждающей её клинической картины не могут стать основой для постановки диагноза. Такие результаты стоит учитывать, когда у пациента в прошлом было аналогичное заболевание, и он прошел курс соответствующего лечения.

Определение наследственных признаков крови, подтверждение или опровержение отцовства, изучение наследственных и аутоиммунных болезней, установка природы и источника инфицирования при эпидемиях – все это помогают выявить серологические исследования крови. Расшифровка результатов дает информацию о присутствии специфических белков к инфекциям типа сифилис, гепатит, ВИЧ, токсоплазмоз, краснуха, корь, брюшной тиф.

Диагностика инфекций

В основе серологических реакций находится способность антигенов и антител взаимодействовать, образовывая иммунные защитные комплексы в крови при заболевании. Анализ крови, таким образом, по характеру химической серологической реакции при добавлении или антигена, или антитела, помогает определить наличие инфекции в организме.

Серологический анализ крови – это метод лабораторного исследования крови, с помощью которого диагностируются инфекционные заболевания и определяется стадия развития инфекционного процесса. Основываются результаты на различной степени взаимодействия антигенов и антител, что помогает выявить серологическая химическая реакция.

Серологический анализ крови используют в таких ситуациях:

  • определение количества антител против инфекционных возбудителей в организме; при таком анализе изначально в сыворотку крови добавляют антиген возбудителя болезни, и тогда оценивают химическую реакцию, которая происходит;
  • противоположная ситуация – когда инфекция определяется по содержащимся антигенам; тогда в кровь добавляют антитела, чтобы выявить антиген;
  • также данный анализ используют при определении группы крови пациента.

Если в процессе свертываемости крови присутствуют отклонения, тем более, если есть гиперкоагуляция, то это может привести к плохим последствиям, таким как инфаркт, инсульт или тромбоз.

Анализ крови на серологические реакции проводится натощак. Для исследований используется сыворотка крови. В ней во время исследования определяют взаимодействие антител и антигенов.

Данный метод лабораторного исследования используют для определения инфекционных заболеваний, таких как:

  • лямлиоз;
  • амебиаз;
  • токсоплазмоз;
  • цистицеркоз;
  • описторхоз;
  • токсокароз;
  • трихинеллез;
  • эхинококкоз.

Также серологический анализ назначается в таких ситуациях:

  • при болезни печени;
  • при аутоиммунных заболеваниях;
  • при варикозном расширении вен;
  • при сердечно-сосудистой патологии;
  • при отклонениях в свертываемости крови;
  • при обследовании беременных;
  • обследование перед и после операции;
  • чтобы определить насколько эффективно проходит лечение;
  • повторно после окончания курса лечения.

В основном этот анализ используют в венерологии и урологии.

Нормой результата анализа на серологические реакции является отсутствие антител к возбудителям, что говорит об отсутствии инфекций в организме. Однако, как правило, этого не бывает, раз уже есть основания для назначения данного серологического анализа.

Он всегда проводится два раза, чтобы определить динамику заболевания, поскольку однократное определение взаимодействия антител или антигенов не отражает картины заражения. Показатель заражения – это увеличение количества связей между антителами (иммуноглобулинами) и антигенами при следующем исследовании.

Повышенное количество комплексов антител и антигенов в организме говорит о присутствии инфекционной болезни в организме. При возрастании показателей в крови проводят специфические химические реакции, которые помогают определить болезнь и ее стадию.

При сдаче любого анализа – главное соблюдать правила подготовки к нему. И проследить, чтобы забор крови проходил в санитарных условиях, чтобы в испытываемую кровь не попало ничего постороннего

И важно сдавать анализ натощак. На предыдущий день не перегружать организм жирной едой, алкоголем и сладкими напитками

Исключить стресс и физические нагрузки.

Тиреотропный гормон ТГТЧто такое Тиреотропный гормон (ТГТ)? Тиреотропный гормон — норма, повышен и понижен. Показания к анализу. Какую функцию выполняет.

Эстрадиол норма у женщинГормон Эстрадиол норма у женщин. Эстрадиол повышен и понижен, в чем причины? Показания к анализу крови.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицина и рак
Adblock detector